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寻找包装正确蛋白质的方法
 [打印]添加时间:2020-09-11   有效期:不限 至 不限   浏览次数:632
 
  使用更简单的方法来检测通常用作抓取蛋白质的分子标记的分子,从复杂混合物中纯化特定蛋白质分子将变得更加容易。
 
  包含许多连接的氨基酸分子的蛋白质构成了分子生物学的主要力量,完成了许多化学任务,包括催化生命的化学反应,打开和关闭基因以及在细胞之间接收和响应信号。研究人员需要生产和纯化选定的蛋白质,以研究其在药物研究,生物技术和细胞生物学基础研究中的活性。
 
  感兴趣的蛋白质通常是通过将编码它们的基因插入会产生这些蛋白质的细胞中来制备的,但是这留下了从潜在的复杂混合物中鉴定和纯化所需蛋白质的问题。一种常见的策略是修饰编码蛋白质的基因,以使该蛋白质携带一串称为组氨酸的氨基酸分子,从而形成一个多组氨酸标签。
 
  该研究的第一作者弗拉德·斯特凡·拉杜卡努(Vlad-Stefan Raducanu)解释说:“标签的作用就像是装在袋子上的提手一样。”“通过捕获标签来捕获蛋白质要容易得多。”
 
  可以使用电场分离不纯样品中的各种蛋白质,以不同的速度将它们拉过凝胶,这一过程称为凝胶电泳。然后将凝胶转移到膜上,并使用抗体(也是蛋白质的一种形式)可视化带有聚组氨酸标签的蛋白质的区域,以选择性地结合标签。但是,这种类型的检测可能很麻烦。
 
  现在,拉杜卡努和他的同事们开发了一种更简单的检测程序,该程序避免了膜转移步骤和抗体的使用。
 
  他们构建了一种化学复合物,该复合物与多组氨酸标签结合,并且可以被紫外线(UV)刺激以可见光发出荧光。带有标签蛋白的凝胶区域可以很容易地被结合在标签上的紫外线激发的“荧光团”复合物发出的光检测出来。
 
  Raducanu解释说:“设计合适的紫外线可激发荧光团是一项挑战。”研究小组必须将其复合物的荧光成分耦合到另一个含有可以与多组氨酸标签结合的金属离子的部分。
 
  Raducanu说:“我们现在计划与KAUST的化学家合作开发甚至更亮的染料,”他表示希望可以更广泛地采用紫外线激发荧光团的有用性,以帮助研究人员检测所需的蛋白质。